P2RY12（也稱為P2Y12）是一種腺苷5'-二磷酸（ADP）受體，也是嘌呤能G蛋白偶聯受體P2Y家族的成員。它在外周

組織的血小板中表達，也在中樞神經系統的穩態小膠質細胞（Homeostatic Microglia)中特異性表達。由于P2RY12幾乎

不在巨噬細胞中表達，所以它是用于區分存在腦血管周圍的巨噬細胞和小膠質細胞的有效標志物^1）。此外，ADP可用

作細胞損傷的信號，小膠質細胞中的P2RY12被認為在接收神經細胞損傷方面發揮作用。

本產品為豚鼠來源多克隆抗體，可用于免疫組織染色的多重染色。

外觀：液體

濃度：蛋白濃度0.45～0.65 mg/mL

1) Butovsky, O. et al.: Neurosci., 17(1), 131(2014).

抗體信息

※ 大鼠的染色實例請查看下方“數據”部分。

Protocol（示例）

1 灌注固定

使用檸檬酸鈉/PBS灌注除血后，4% PFA灌注

2 后固定

4% PFA（～24 h）

3 蔗糖替換

30%蔗糖/PBS（4℃，過夜~約2天）

4 制備冰凍切片

去除蔗糖后，制備冰凍包埋塊，并用低溫恒溫器制備30 μm厚的切片

5 封閉

5%正常山羊血清，0.3% Triton X-100/PBS（4℃，過夜）

6一抗

抗P2RY12，豚鼠（1︰1,000），1%正常山羊血清，0.3% TritonX-100/PBS（4℃，過夜~2 天）

7 清洗

0.3% TritonX-100/PBS (5 min×3次)

8 二抗

Alexa Fluor? 488 AffiniPure Goat Anti-Guinea Pig IgG（H+L）（1:500）（產品編號：568-77901)，1%正常山羊血清，0.3% TritonX-100/PBS（室溫，2 h）

9 清洗

0.3% TritonX-100/PBS（5 min×3次）

10 封裝

封片劑封裝，4℃下避光存儲

性能數據

與抗Iba1抗體比較

使用抗P2RY12抗體和抗Iba1抗體對小鼠大腦（冰凍切片）進行免疫組織染色。

<數據提供>

京都工藝纖維大學 應用生物學系 宮田老師

使用抗體

P2RY12

一抗：抗P2RY12，豚鼠（產品編號：011-28873，本產品）1︰1,000

二抗：Alexa Fluor? 488 AffiniPure Goat Anti-Guinea Pig IgG（H+L）（產品編號：568-77901）

Iba1

一抗：抗iba1，兔源（免疫細胞化學用）（產品編號：019-19741）1︰1,000

二抗：Alexa Fluor? 594-AffiniPure Goat Anti-Rabbit IgG（H+L）（產品編號：566-80511）

【結果】

已確認P2RY12信號和Iba1信號的共定位。

鑒別小膠質細胞和巨噬細胞

使用抗P2RY12抗體（小膠質細胞標志物）、抗Iba1抗體（小膠質細胞/巨噬細胞標志物）和抗層粘連蛋白抗體（腦血管基底膜標志物）對小鼠大腦皮層和延

髓末端的冰凍切片進行三重染色，確認細胞定位。

<數據提供>

京都工藝纖維大學 應用生物學系 宮田老師

使用抗體

P2RY12

一抗：抗P2RY12，豚鼠（產品編號：011-28873，本產品）1︰1,000

二抗：Alexa Fluor? 488 AffiniPure Goat Anti-Guinea Pig IgG（H+L）（產品編號：568-77901）

Iba1

一抗：抗iba1，兔源（免疫細胞化學用）（產品編號：019-19741）1︰1,000

二抗：Alexa Fluor? 594-AffiniPure Goat Anti-Rabbit IgG（H+L）（產品編號：566-80511）

層粘連蛋白

一抗：抗層粘連蛋白抗體（大鼠，宮田老師實驗室制備）1︰200

二抗：DyLight? 405 結合AffiniPure 山羊抗大鼠 IgG (H+L)（生產商編碼：112-475-003）

【結果】

Iba1陽性細胞中，腦實質內的細胞呈P2RY12陽性，可能是小膠質細胞（三角箭頭）。而Iba1陽性/P2RY12陰性的細胞存在于腦血管基底膜周圍，這些細胞可

能是巨噬細胞（箭頭）。

與抗Iba1抗體和抗TMEM119抗體比較

使用抗P2RY12抗體、抗Iba1抗體和抗TMEM119抗體對小鼠大腦和脊髓（冰凍切片）進行免疫組織染色。

使用抗體

P2RY12

一抗：抗P2RY12，豚鼠（產品編號：011-28873，本產品）1︰1,000

二抗：Alexa Fluor? 647 AffiniPure Donkey Anti-Guinea Pig IgG (H+L)（產品編號：566-78421）

Iba1

一抗：抗iba1，山羊源（產品編號：011-27991）1︰1,000

二抗：Alexa Fluor 488 AffiniPure Donkey Anti-Goat IgG (H+L) (產品編號：561-78351)

TMEM119

一抗：其他公司抗TMEM119抗體（兔源）1︰100

二抗：Alexa Fluor? 594-AffiniPure Donkey Anti-Rabbit IgG（H+L）（產品編號：561-78471）

【結果】

與抗TMEM119抗體相比，使用FUJIFILM Wako的抗P2RY12抗體染色能更清晰地檢測細微的突起結構。

與其他公司產品比較

使用本產品和其他公司的抗P2RY12抗體對小鼠大腦和脊髓（冰凍切片）進行免疫組織染色。

使用抗體

本產品

一抗：抗 P2RY12，豚鼠（產品編號：011-28873，本產品）1︰1,000（抗體濃度：0.5 μg/mL）

二抗：Alexa Fluor? 488 AffiniPure Donkey Anti-Guinea Pig IgG (H+L)（產品編號：562-78401）

其他公司產品

一抗：其他公司 抗P2RY12（兔源）1︰200（抗體濃度：0.5 μg/mL）

二抗：Alexa Fluor? 488 AffiniPure Donkey Anti-Rabbit IgG（H+L）（產品編號：567-78451）

【結果】

傳統產品中可觀察到神經細胞的非特異性信號（三角箭頭），而本產品中幾乎檢測不到非特異性信號。

應用數據

免疫組織染色

用戶反饋

以下是研究人員提供的評估問卷結果。

評價（原文翻譯）

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